荧光素能与真菌细胞壁的β-多糖物质相结合，如纤维素、几丁质等，但不能与组织细胞结合。荧光素在紫外线激发光下使各种丝状真菌及酵母菌呈现荧光，包括念珠菌属、毛藓菌属、表皮藓菌属、小孢子菌属、组织胞浆菌属及曲霉属等。染液中氢氧化钾能溶解样品组织中的角质、消除杂质，促溶剂的加入使得样品组织中的角质溶解的更加迅速，组织更加透明，提高了检测灵敏度。选取的背景复染液能降低样品组织的背景亮度，使荧光信号更加清晰。