特异性IgE检测是一种常用的过敏原诊断方法。它的作用原理是通过检测血液中特异性IgE抗体的存在来确定患者是否对某种过敏原产生了过敏反应。
特异性IgE检测有多种方法,包括皮肤划痕试验、皮内试验、ELISA(酶联免疫吸附试验)和免疫印迹等技术。下面将分别介绍这些方法的操作步骤。
皮肤划痕试验
皮肤划痕试验是简单和常用的特异性IgE检测方法之一。其操作步骤如下:
(1)选择合适的部位:在前臂或上臂背侧选取清洁、无损伤的皮肤。
(2)标记:用水笔在皮肤上划出15mm*15mm的正方形,并在正方形内使用同一针头划3-4个小孔。
(3)加入过敏原:使用专业的划痕器,在每个小孔处滴入不同的过敏原溶液。
(4)刺激:用划痕器在每个小孔处轻轻划过皮肤表面,使过敏原能够穿过皮肤进入组织内。
(5)观察:等待15-20分钟后,观察皮肤上是否出现红斑或水疱等过敏反应。
皮内试验
皮内试验是一种更加灵敏的特异性IgE检测方法。其操作步骤如下:
(1)选择合适的部位:在前臂或上臂背侧选取清洁、无损伤的皮肤。
(2)标记:用水笔在皮肤上划出15mm*15mm的正方形,并在正方形内使用同一针头注射不同浓度的过敏原溶液。
(3)观察:等待15-20分钟后,观察皮肤上是否出现红斑或水疱等过敏反应。
(4)测量:使用皮肤反应直径测量工具测量皮肤反应的大小,并对结果进行记录和分析。
ELISA(酶联免疫吸附试验)
ELISA是一种基于抗体与抗原结合的检测方法,也可以用于检测特异性IgE。其操作步骤如下:
(1)制备样品:采集患者血液样品,并将其离心分离血清。
(2)制备检测板:在96孔板上固定过敏原或抗原,并用BSA(牛血清白蛋白)等物质封闭孔洞,避免非特异性结合。
(3)加入样品:将标记有酶的抗IgE抗体添加到每个孔中,然后加入患者血清样品,使其与被固定的抗原结合。
(4)洗涤:移除未结合的物质。
(5)加入底物:加入底物,使标记的酶能够反应,产生发光信号。
(6)测量:使用ELISA阅读器测量每个孔的发光信号强度,并对结果进行分